استرجاع البويضات (Oocyte Pick up)

تظهر نتائج الدراسات أن جرعة 5000 وحدة hCG لها نتائج مماثلة مقارنة بجرعة 10000 وحدة من حيث نضج البويضة والتخصيب والحمل. لا يؤدي استرجاع البويضات لفترات طويلة بعد إعطاء  hCGإلى زيادة خطر الإباضة بشكل كبير وليس له أي تأثير سلبي على جودة البويضات أو معدل الإخصاب أو النتائج الإجمالية لدورات تقليل ناهض (آغونیست) GnRH، ولكن الحصاد المبكر قد ينتج عنه عدد أقل من البوی الناضجة. متلازمة الجريب الفارغ هي عدم وجود بويضة أثناء استرجاع بصيلات المبيض وتحدث في 5.0-1% من دورات التلقيح الاصطناعي IVF.

تشمل الأسباب إدارة hCG المتأخرة أو عدم تناولها أو انخفاض النشاط البيولوجي التجاري ل hCG. تركيز مصل hCG في الدم بعد 36 ساعة من الحقن حوالي 300-100 وحدة لكل لتر. كما هو الحال مع الإطلاق المفاجئ للهرمون اللوتيني LHفي الدورات العادية، تتسبب hCG في استئناف الانقسام الاختزالي في البويضات الأولية التي توقفت عند المرحلة الكاملة من الانقسام الانتصافي. في النساء الطبيعيات، تحدث الإباضة التلقائية بعد حوالي 30 إلى 36 ساعة من تدفق الهرمون اللوتيني LH surge، بينما في دورات تحفيز الإباضة، تحدث الإباضة التلقائية بعد 36 إلى 40 ساعة من حقن hCG لذلك، يجب إجراء الإباضة بعد 24-36 ساعة من إعطاء hCG في دورة التلقيح الاصطناعي IVF، وبعد ذلك، يتم إطلاق البويضات وإطلاقها في منطقة كالدوسا.

يتم تقييم جودة مجمع البويضات الركامية (CoC) من خلال حجم وكثافة الخلايا الحبيبية حول البويضة ودرجة الالتصاق بينها. تحتوي خلايا الركام حول البويضة البالغة على نمط تاج شعاعي من النمط الشمسي. يمكن فحص البويضة عند إزالة الخلايا الركامية المحيطة بها. بعد إزالة الخلايا الركامية المحيطة، يمكن فحص البويضة لوجود أو عدم وجود أول جسم قطبي أو نواة مائیة (Germinal vesicle)، تحت المجهر الضوئي. تتوقف خلية البويضة الناضجة في المرحلة الانتصافية الثانية. الجسم القطبي المثالي مستدير أو بيضاوي الشكل وله سطح أملس.

النضج النووي للبويضة وحدها لا يكفي لتحديد جودتها، ولكن النضج السيتوبلازمي للبويضة له أهمية خاصة أيضًا ومن المهم أن يتم نضج النواة والسيتوبلازم في البويضة في وقت واحد وبتناغم. يؤدي عدم التزامن في النواة ونضج السيتوبلازم إلى مجموعة متنوعة من التشوهات المورفولوجية في البويضة. قد يعكس وجود الجسم القطبي التنكسي الأول عدم تناسق نضج النواة والسيتوبلازم، وهو علامة على ضعف جودة البويضة. غالبًا ما يحدث عدم توافق سن البلوغ في فرط تحفيز المبايض. ما يقرب من 85٪ من البويضات المسترجعة في المرحلة الطورية من الانقسام الاختزالي الثاني وتم إزالة أول جسم قطبي لها. ومع ذلك، أظهر الفحص بالمجهر المستقطب أن بعض البويضات لا تزال غير ناضجة على الرغم من رحيل الجسم القطبي الأول. 10٪ من البيض عبارة عن نوى مائية (جرمینال وزیکول ) و 5٪ من البيض في المرحلة الطورية للانقسام الاختزالي الأول (متافاز میوز).

النضج النووي للبویضة يتميز بخروج أول جسم قطبي ووجوده في الفراغات المحيطة بصفار البویضة (perivitelline spacs)  وغياب وزیکول جرمینال. تفتقر بيضة المرحلة الطورية من الانقسام الاختزالي الأول إلى جسم قطبي، لكن وزیکول جرمینال ونواةها اختفتا. يجب أن أبقى بويضات المرحلة الانتصافية في وسط الاستزراع لفترة أطول قبل الإخصاب وأن يتم فحصها لمعرفة رحيل الجسم القطبي الأول. بيضة الطور الانقسام الاختزالي (GV) غير ناضجة. ترتبط بعض الاضطرابات المورفولوجية للبویضة مثل زيادة تحبيب جرانولة السيتوبلازم ووجود فجوة واکوئول وشكل غير طبيعي للجسم القطبي الأول واضطرابات القوباء المنطقية زونابلوسیدا بنوعية البويضة.

تحتوي البويضة العملاقة (Giant o0cyte) على كروموسومات إضافية، وتحت الفحص المجهري الاستقطابي، لها مغزلان انقسام مختلفان، مما يعكس وجود خلل وراثي. لا ينبغي استخدام هذه البويضات للتخصيب. الأجنة من هذه البويضات غير نشطة كروموسوميًا، على الرغم من أنه قد يكون لها انقسام طبيعي ومراحل نمو طبيعية حتى مرحلة الكيسة الأريمية (بلاستوسیت). يزيد نقل هذه الأجنة من خطر الإجهاض. يمكن أن يوفر نوع طريقة تحفيز المبيض، ومستوى AMH، وظهور الخلايا الركامية والخلايا الشعاعية التاجية، ووجود وموقع الانقسام الانتصافي للمغزل، ومورفولوجيا السيتوبلازم والتركيبات خارج السيتوبلازم للبويضات معلومات مهمة حول حالة نضج البويضات وجودة الأجنة الناتجة.