استرجاع البويضات
زرع الأجنة (Embryo culture)
لقاح (Fertilization)
يتم فحص حالة السائل المنوي مرة أخرى قبل أو بعد سحب البويضة. بعد الغسل والتحضير ، يتم تحضين(انکوباتور) السائل المنوي في وسط مزرعة يحتوي على الألبومين لمدة 40-30 دقيقة لتحقيق قدرة الحيوانات المنوية. بشكل عام ، بالنسبة لعمليات التلقيح الصناعي IVF التقليدية ، يتم أخذ 100،000-50،000 حيوان منوي متحرك تقدمي لكل بويضة في الاعتبار ، وعند 37 درجة مئوية ، وثاني أكسيد الكربون بنسبة 5-7٪ ونسبة الرطوبة 98٪ ، لمدة 12-18 ساعة، ويتم تحضينها مع البویضة.
معدل الإخصاب في عمليات التلقيح الاصطناعي IVF التقليدية حوالي 70-50٪. العامل الذكوري هو أحد الأسباب الأكثر شيوعًا للعقم عند الأزواج الذين يخضعون لدورات علاج 1VF ، وإذا كان هناك عامل ذكر أو تاريخ من فشل الإخصاب ، فيمكن تحقيق الإخصاب من خلال CSI.في الحقن المجهري ICSI ، ليست هناك حاجة لحدوث تفاعل أجزي في الحيوانات المنوية أو ربط الحيوانات المنوية بغشاء البويضات الذي يحدث في الإخصاب الطبيعي. بدلاً من ذلك ، ينشط التمزق الميكانيكي للبويضات وأغشية الحيوانات المنوية (الذي يتم تسهيله من خلال عملية تجميد الحيوانات المنوية والطموح اللطيف وإعادة الحقن في سيتوبلازم البويضة). في معظم الحالات ، فإن معدل الإخصاب الناتج عن الحقن المجهري ICSI يمكن مقارنته بمعدل الإخصاب في التلقيح الاصطناعي IVF التقليدي (في حالة عدم وجود سبب ذكر) 70-50٪ المؤشر الرئيسي للحقن المجهري ICSI هو العقم عند الذكور.
تشمل المؤشرات الأخرى للحقن المجهري ICSI الحيوانات المنوية الناتجة عن الجراحة ، والتشخيص الجيني للجنين قبل الزرع ، وتاريخ فشل التلقيح الاصطناعي IVF التقليدي ، وسوء معدل الإخصاب ، والبويضات الناضجة في المختبر ، واستخدام البويضات المجمدة ICSI. قد يرتبط الحقن المجهري ICSI بمعدلات أعلى من الإخصاب. ليس لدى الحقن المجهري ICSI أي ميزة على التلقيح الاصطناعي IVF التقليدي في غياب العقم الناجم عن الذكور. في الواقع ، تشير الدلائل إلى أن التلقيح الاصطناعي IVF التقليدي يؤدي إلى معدلات أعلى من الانغراس والحمل السريري. بعد حوالي 18-20 ساعة من التلقيح الاصطناعي IVF و16-18 ساعة بعد الحقن المجهري ICSI ، يتم فحص البويضة الملقحة (البيضة الملقحة) لوجود نواة بروتون من الذكور والإناث (2PN).
تحتوي البويضة المخصبة بشكل طبيعي على نواة أولية (واحدة مشتقة من بويضة والأخرى من حيوان منوي) ويمكن رؤية جسمين قطبيين في الفراغ حول صفار البيض. يجب فحص الحيوانات الملقحة (زیغوت) بعناية بحثًا عن سلائف إضافية ، حيث قد تتضح الأجنة متعددة الصيغ الصبغية (بلی بلوئید)بشكل طبيعي ولا يمكن اكتشافها في المراحل اللاحقة من انقسام الانقسام(کلیواج) . تم العثور على تعدد الصبغيات (بلی بلوئید) في حوالي 5-10٪ من جميع الأجنة ، ولكنه أكثر شيوعًا في البويضات غير الناضجة من البويضات البالغة (حوالي 30٪ مقابل 1-2٪).
بالإضافة إلى تعدد النطاف ، قد يحدث تعدد الصبغيات نتيجة لتلقيح الحيوانات المنوية ببويضة ثنائية الصبغيات (digeny) ، وهو أحد أخطاء المغزل. هذه الأحداث أكثر شيوعًا في البويضات غير الناضجة (immature) وما بعد النضج(postmature) . في CSI | أربعة في المئة من الملقحات تظهر علامات ثلاثية الصبغيات digynic triploidy . في هذه البيضة الملقحة ، يوجد حيوان منوي في البويضة ولكن لا يتم إزالة الجسم القطبي الثاني. في هذه الحالات ، يتم تنظيم كروموسومات النوى الثلاثة في عمود الدوران في مرحلة التزاوج مرحله syngamy ، مما يشير إلى أن مركزًا واحدًا فقط مشتق من حيوان منوي نشط.
احتمال وجود نواة بروتون مفردة (1PN هو 2٪ ) في التلقيح الاصطناعي IVF و 5٪ في الحقن المجهري ICSI. إن وجود زيجوت ثلاثي النواة (3PN عند 1VF هو أكثر شذوذ إخصاب شيوعًا في البشر. تحدث هذه الحالة في الغالب بسبب تشتت 3PN ، 2 الأجسام القطبية (dispermy polarbodies. تنقسم معظم هذه الأجنة ، ولكن يتوقف نموها في المراحل المتأخرة من التطور. بشكل عام ، يجب أن يكون كلا النوى (برونوکلئوس) في الجزء المركزي من سيتوبلازم البویضة. وجود الكروموسومات يمكن حدوث تشوهات عن طريق فحص موضع النوى (برونوکلئوس) في السيتوبلازم وحجمها وتوزيع النوى و من الممكن تحديد موضع الجسم القطبي بالنسبة إلى النواة الأولية. تستغرق عملية الإخصاب حوالي 24 ساعة الانقسام (کلیواج) ينتهي.
المصدر: المناهج السريرية للعقم في بيولوجيا الإنجاب
اقرأ أيضًا:
